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Come utilizzare l'agitatore ad alta efficienza per il passaggio delle cellule

La coltura a passaggio cellulare si riferisce al processo di divisione della coltura in piccole parti e di reinoculazione in un altro recipiente di coltura (bottiglia) per ulteriore coltura.Agitatore cellulare ad alta efficienzaè un materiale di consumo comune per la coltura cellulare in sospensione, quindi come utilizzare l'agitatore cellulare ad alta efficienza per il passaggio delle cellule?

Come utilizzare l'agitatore ad alta efficienza per il passaggio delle cellule1

Per loro natura, le cellule in sospensione non sono aderenti, quindi non sono necessari enzimi per staccarle dalla superficie dell'agitatore ad alta efficienza.In laboratorio generale, il passaggio diretto e il passaggio centrifugo sono comunemente usati per effettuare il passaggio delle cellule sospese.Quando si osserva che le cellule sono ricoperte dall'80 al 90% (la sospensione cellulare diventa gialla), le cellule sono pronte per il passaggio.

Se le cellule crescono bene al microscopio, è possibile utilizzare il passaggio diretto.Il mezzo inpallone agitante ad alta efficienzaè stato suddiviso proporzionalmente nel nuovo pallone di coltura ed è stato aggiunto il terreno fresco.Il giorno successivo è stata osservata la densità cellulare per determinare se il fluido era necessario.

Se le condizioni della cella sono scadenti, è necessario utilizzare il metodo del passaggio centrifugo.Innanzitutto la sospensione cellulare viene trasferita neltubo da centrifuga, centrifugate a 1000 giri/min per 5 minuti, quindi il surnatante viene scartato, i precipitati cellulari vengono delicatamente dispersi e le cellule vengono risospese con terreno fresco.Infine, la quantità adeguata di sospensione cellulare viene assorbita con una cannuccia e inserita in una nuovabottiglia di culturae viene aggiunta la quantità appropriata di terreno fresco.Continua a coltivare.

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Orario di pubblicazione: 18 aprile 2023