Il ceppo liquido è un ceppo coltivato con terreno di coltura liquido.Presenta i vantaggi di un ciclo di produzione di ceppi brevi, età batterica costante, inoculazione conveniente, adatta alla produzione in fabbrica e così via.È stato accolto con favore dalla maggior parte dei coltivatori.Agitatore cellulare （https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/） è un tipo di materiale di consumo necessario nella coltura di ceppi liquidi.Nella cultura è necessario prestare attenzione ai seguenti punti:

1.Preparazione del terreno di coltura secondo la formula dei vari componenti, nel contenitore, sciogliere con acqua, diviso in bottiglie triangolari, generalmente flacone di agitazione cellulare da 250 ~ 300 ml, terreno di coltura da 50 ml,Flacone triangolare da 500 ml  （https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/）Terreno di coltura da 100 ml, tampone di cotone, avvolto in un giornale;Può anche essere costituito da 8 strati di garza per sigillare il tappo della bottiglia da 8 cm x 8 cm, all'esterno con sigillatura in carta marrone.
2. Per la sterilizzazione viene generalmente adottato il metodo di sterilizzazione in autoclave, che richiede 121 ℃ e 30 minuti.Toglierlo e raffreddarlo a circa 30 ℃.Mettilo nella stanza sterile o nella scatola di inoculazione per l'uso.
3. In base ai requisiti operativi asettici, ciascuna bottiglia può essere collegata a un ceppo inclinato di 2 ~ 3 cm2 e ogni ceppo inclinato può essere collegato a 4 ~ 5 bottiglie.È meglio portare con sé un po' di terreno con i ceppi aggiunti, in modo che possano galleggiare sulla superficie del terreno.Dopo l'inoculazione, coprire l'imboccatura della bottiglia con la garza originariamente tappata e legarla saldamente con lo spago.
4. La bottiglia del ceppo inoculato può essere collocata in un letto agitante per la coltura, oppure può essere posta a una temperatura costante di 24 ~ 26 ℃ per 48 ore, quindi la coltura oscillante può essere eseguita dopo che il micelio aerogeno è stato esteso nel mezzo di coltura .La frequenza di oscillazione dell'agitatore alternativo è 80 ~ 120 giri/min, mentre quella dell'agitatore rotante è 150 ~ 220 giri/min.3 ~ 4d possono essere coltivati ​​nello shaker.Alla fine della coltura, a causa dei diversi ceppi, il terreno di coltura appariva di colori diversi, come il fungo ostrica, il terreno di coltura del fungo enoki era giallo chiaro;Il terreno di coltura del fungo ericius erinaceus era bruno-rossastro e aveva un profumo di fungo;Il terreno di coltura del fungo è marrone, denso e dolce.Il terreno di coltura può essere utilizzato per la produzione o per l'ulteriore espansione della coltura solo quando il peso secco del micelio raggiunge 10 g/l e il diametro dei pellet di micelio è 1 ~ 2 mm.
 
5. Produzione di ceppo liquido secondario Produzione di terreno di coltura con ceppo liquido secondario dello stesso livello di ceppo liquido, il contenitore di coltura deve essere più grande, la capacità non è superiore a 3500 ml.Dopo la sterilizzazione e il raffreddamento, sono stati inseriti i ceppi liquidi primari fermentatiAgitatore per cellule da 5 litri（https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/）con un rapporto del 5%-10% e coltivato su un agitatore a bassa velocità.Dopo un certo tempo di coltura oscillante si possono ottenere ceppi liquidi con distribuzione uniforme di microsfere e liquido di fermentazione limpido.
In sintesi, quando si utilizza l'agitatore cellulare per coltivare ceppi liquidi, operare secondo i metodi sopra indicati e prestare attenzione a controllare la temperatura, la frequenza di agitazione e altri fattori nel processo per garantire l'effetto della coltura.
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