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Come utilizzare le fiasche di agitazione ad alta efficienza per il passaggio delle cellule

Quando utilizziamo alcuni materiali di consumo per colture cellulari, incontriamo sempre il problema del passaggio cellulare.Oggi condivideremo brevemente con voi come utilizzare le fiasche di agitazione ad alta efficienza per il passaggio delle cellule.Quando usiamo boccette di agitazione ad alta efficienza(https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/) per il passaggio cellulare, è possibile scegliere tra due metodi, ad esempio la raccolta delle cellule mediante centrifugazione e quindi passaggio, o il metodo diretto passaggio.

Metodo del passaggio centrifugo:

(1) Trasferire le celle nel filepallone di agitazione ad alta efficienza insieme al terreno di coltura in una provetta da centrifuga per la centrifugazione.

(2) Eliminare il surnatante, aggiungere un nuovo terreno di coltura al tubo da centrifuga Epipettaper formare una sospensione cellulare.

(3) Contare e inoculare rispettivamente in nuove fiasche di coltura.

Se si adotta il passaggio diretto, lasciare che le cellule sospese si depositino lentamente sul fondo del pallone di agitazione ad alta efficienza, aspirare 1/2~2/3 del surnatante e quindi pipettare per formare una sospensione cellulare prima del passaggio.

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Ciò a cui bisogna prestare attenzione durante l'operazione è che la trypsin sia preriscaldata, e la temperatura sia di circa 37°C.La velocità di centrifugazione dovrebbe essere appropriata.Se la velocità è troppo bassa, le cellule non possono essere separate in modo efficace.Se la velocità di centrifugazione è troppo elevata e il tempo è troppo lungo, le cellule verranno schiacciate, causando danni o addirittura la morte.Le cellule dovrebbero essere osservate regolarmente e, se viene rilevata una contaminazione, dovrebbe essere trattata in tempo.


Orario di pubblicazione: 04 gennaio 2023